风味是动物产品非常重要的感官特性。随着生活水平的提高,人们对动物产品的要求不断提高。表面颜色、触感及风味等是人们在选择动物产品时可通过感官获得的第一信息,在食品质量评价中占据重要地位。其中,风味是动物产品非常重要的感官特性,主要包括香味和味道,香味的产生主要源于食物中的挥发性风味物质(如挥发性脂肪酸等),脂质反应和美拉德反应是其产生的主要途径;味道源于食物中多种有机物质(如氨基酸和核糖等物质)。食品感官评价最初是通过人口、鼻、舌等器官完成,如通过培训较为专业感官接触的小组评定食物间的细微差异或者直接通过消费者群体对肉类进行评定,多次重复后以获得科学的结果。随着食品加工业和科技的发展,感官评价逐渐趋于专业化,出现了更为灵敏和客观的检测方式,如色谱-质谱联用、 核磁共振及电子鼻等技术,这些技术在肉类风味物质检 测中的优缺点如表1所示。本文综述目前检测肉类风味的主要技术,相较于之前发表的此类综述,本文聚焦于色谱-质谱联用技术、核磁共振技术及电子鼻技术,总结其最新研究进展及应用,为肉类风味物质的研究提供一定的理论依据。
1超高效液相色谱-质谱
超高效液相色谱-质谱是21世纪初发展起来的分析技术,它是结合了液相色谱的高效分离能力和质谱的高灵敏度的分离检测技术,具有应用广泛、分离能力强、灵敏度高、分析速度快和自动化程度高等特点,也存在仪器复杂性高、样品处理复杂、数据处理复杂及重复性较低等不足,其主要原理可分为4 部分:样品制备、超高效液相色谱分离、质谱检测和数据分析。与其他检测方法不同之处主要表现在超高效液相色谱分离,其色谱柱内填充有高效液相固定相。在肉类风味前体物质的检测中,超高效液相色谱-质谱常用于对游离氨基酸和挥发性脂肪酸的检测。在牛肉风干过程中,不同的风干方式可造成风味相关物质的不同。利用超高效液相色谱-质谱,有学者发现常规成熟方法挥发性物质含量较高。同样是利用超高效液相色谱-质谱的方法研究牛肉,Setyabrata 等还发现成熟牛肉中含有更多的短链多肽,但多不饱 脂肪酸和游离脂肪酸较少。
2顶空微萃取-气相色谱-质谱
顶空微萃取-气相色谱-质谱法是分析风味物质的常用方法之一,其原理是采用顶空的进样方式,通过加热使风味挥发性物质从样品中分裂,具有样品制备简单、灵敏度高等优点,但也存在样品处理复杂、分辨率低、仪器成本高、样品存在损失及非常规样品难处理等不足。顶空微萃取-气相色谱-质谱法可分为顶空液相微萃取和顶空固相微萃取2 种。在肉类风味物质的检测中,顶空微萃取-气相色谱-质谱法运用广泛。Zhen Zongyuan等采集鸭肉中3 种不同部位(胸部、腿部和翅膀),利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法提取了挥发性风味物质并进行测定,共检出81 种挥发性物质,包括15 种碳氢化合物、10 种醇、7 种酸、12 种醛、4 种酯、19 种含硫和含氮化合物以及14 种其他化合物。Zhang Xue等利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术探究不同饲养方式对藏羊肌肉代谢的影响,研究表明,畜舍饲养组的肉营养品质(包括蛋白质和脂肪含量)和食用品质(包括嫩度、持水力、口感和风味)均优于传统放牧组。
3全二维气相色谱-飞行时间质谱联用
全二维气相色谱是20世纪90年代发展起来的技术, 相较于传统气相色谱技术,其具有更高的灵敏度、选择性和峰容量,同时它的另一个优势是同系物系列(如直链烷烃、脂肪酸甲酯等)的有序洗脱模式,但是同样 存在仪器复杂、成本高、样品处理要求严格和数据分析难度大等缺点。全二维气相色谱依靠飞行时间质谱适合分析复杂的物质,其具有全范围质谱学的高采集率。基于全二维气相色谱-飞行时间质谱联用技术的众多优势,其也被用于肉类风味前体物质的检测。氨基酸和还原性碳水化合物之间的美拉德反应是导致肉类产生各种气味和味觉的重要反应之一,其有助于肉类在烹调过程被赋予更多的风味和味道。采用气相色谱-飞行时间质 谱和感官评价相结合的非目标分析方法以及结合最小二乘回归分析,Lee等发现,2-甲基呋喃-3-硫醇、3-磺基戊烷-2-酮等可能对牛肉中美拉德反应产生的风味有关键贡献。
4气相色谱-离子迁移谱
气相色谱-离子迁移谱技术在19世纪中叶发现和创新,20世纪90年代得到了蓬勃发展,其根据物质迁移时间进行定性,根据所形成的峰值和峰面积对物质定量,具有检测时间短、结果可靠及灵敏度高等优点,同时具有设备成本高、操作困难和样品需要预处理等缺点。气相色谱-离子迁移谱技术广泛应用于药物检测、疾病监控和环境保护等领域,近年来也被用于对风味物质的检测。对羊肉挥发性风味物质研究中,有学者利用气相色谱-离子迁移谱分析不同地区羊肉的挥发性风味物质发现,不同地区的羊肉以及不同品种羊肉存在差异。如青海玉树羊肉特征风味物质为2,3-丁二酮、苯甲醛、丁醇、 丙酮、2-丁酮、辛醛和1-辛烯-3-醇等,而2-戊酮和2-己醇等是四川羊肉的特征风味物质。
02核磁共振在肉类检测中的应用
核磁共振技术源于20世纪40年代,直到20世纪80年代末才开始被应用于食品领域。其基本原理是:具有活性自旋的原子核在静态磁场存在的情况下,具有能量的吸收,能量吸收主要通过适当的射频脉冲获得;在脉冲之后,被激发的原子核松弛,其发射的能量被检测为与时间关联的信号强度,该信号将产生与构成核磁共振 信号的激发核,并与激发核的数量成正比;同时每个原子核在频谱显示特定位置,由此产生的谱线可测量的参数就可用于解释分子结构、构象及分子运动等,其具有非破坏性、高分辨率、无毒性及可定量性等优点,也存在仪器复杂、分析时间长及样品准备时间长等缺点。根据磁场强度大小,核磁共振可分为3 类:高场、中场、低场。由于核磁共振技术所产生的的数据较为庞大、繁杂,所以需要对数据进行处理和分析,现有的核磁共振数据分析方法有主成分分析、偏最小二乘法判别分析和正交偏最小二乘法判别分析等。
低场和高场核磁共振在食品领域被广泛应用,低场核磁共振常用于分析食品掺假、食品含有水分类型、水分分布及水分移动等。朱莹莹等利用低场核磁共振鉴别不同干燥方式牛肉干产品,发现不同干燥加工方式牛肉干的T2弛豫特性存在显著差异,且主成分分析有明显分离。Zhang Jian等利用高场核磁共振技术研究无骨干腌火腿加工过程中代谢产物的变化,共鉴定出28 种代谢物,包括氨基酸、多肽、有机酸、核酸及其衍生物、糖等,发现氨基酸(异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、谷氨酸 和组氨酸)、有机酸(乳酸、醋酸盐、琥珀酸、柠檬酸和甲酸盐)和核苷酸衍生物(次黄嘌呤)是影响最终产品滋味的主要因素。
03电子鼻在肉类检测中的应用
仿生嗅觉技术,即电子鼻技术是一种智能仿生系统,最早应用在1982年。其主要是由传感器和模式识别系统组成,基本工作原理是:通过气体采集系统、气敏 传感器列阵和模式识别系统等部分,当被测样品中挥发 性混合气体和传感器接触时,气体与灵敏材料发生反应并产生可收集信息,再利用模式识别系统对信号进行分析,在特定类型的气味检测和识别系统中,其敏感元件的激发导致特定信号的产生。电子鼻技术目前广泛应用于食品安全、环境监测及临床医学诊断等领域。电子鼻应用于风味物质检测,具有快速、高灵敏度和非破坏性等特点,但也存在易受环境干扰、仪器昂贵和学习能力不足的缺点。在肉类风味和品质评定方面,电子鼻 技术常用于对不同品种肉类挥发性气味的检测,其主要通过风味识别、肉质评估、新鲜度识别和风味调控等方面对肉类品质进行调控。Chen Jingru等利用电子鼻和顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术分析证实了北京油鸡、鲁花鸡和AA肉鸡之间的显著差异,醛的种类较多和相对含量较高可能是北京油鸡鸡肉风味更浓郁的原因。北京油鸡必需氨基酸、花生四烯酸、肌苷一磷酸含量高于另外2 种鸡。Wilson等通过电子鼻对叉尾鱼鱼片中的气味化合物进行检测,发现其中存在异味气味化合物,同时传感器列阵输出结果表明,风味良好和风味 差的鱼片香味特征有显著差异,这都表明电子鼻技术可有效、快速评估肉类质量。需要注意的是,电子鼻在肉类风味和品质评定方面的应用仍然面临一些挑战。例如,不同品种肉类之间的挥发性化合物差异较大,因此需要建立合适的模型和数据库。此外,环境条件和样品处理等因素也可能对电子鼻的检测结果产生影响。因此,在实际应用中需要结合其他分析手段和专业知识进行综合评估和判断。
04结 语
对肉类风味物质的检测,无论是色谱-质谱联用技术,还是核磁共振波谱技术,都应用较为广泛。色谱-质谱联用技术可以同时分离和定性分析复杂的肉类风味物质,还可以提供关于风味物质的结构和含量信息。核磁共振作为一种无损分析技术,可以提供关于食品中化学成分的结构和动态信息。电子鼻技术是一种模拟人类嗅觉系统的传感器装置,可以通过探测和识别气体混合物的特征模式来辨别不同的风味。在肉类风味物质检测中,电子鼻技术可以用于分析和区分肉类产品中的挥发性风味物质,具有快速、便捷和非破坏性的特点,用于大规模的样品分析和实时的风味检测。
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参考文献:杜春林,赵春萍,谭 娅. 肉类风味物质检测技术研究进展[J]. 肉类研究, 2023, 37(8): 46-51.
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01 色谱-质谱联用技术在肉类检测中的应用
色谱-质谱联用技术常被用于研究小分子代谢物以及外部刺激、病理生理变化和生物遗传突变引起的上述物质的组成和数量变化。色谱-质谱联用技术可通过分析生物液和组织确定系统生化图谱和整个生物体的功能调节。当前,色谱-质谱联用技术被广泛应用于对风味前体物质的检测。
1超高效液相色谱-质谱
超高效液相色谱-质谱是21世纪初发展起来的分析技术,它是结合了液相色谱的高效分离能力和质谱的高灵敏度的分离检测技术,具有应用广泛、分离能力强、灵敏度高、分析速度快和自动化程度高等特点,也存在仪器复杂性高、样品处理复杂、数据处理复杂及重复性较低等不足,其主要原理可分为4 部分:样品制备、超高效液相色谱分离、质谱检测和数据分析。与其他检测方法不同之处主要表现在超高效液相色谱分离,其色谱柱内填充有高效液相固定相。在肉类风味前体物质的检测中,超高效液相色谱-质谱常用于对游离氨基酸和挥发性脂肪酸的检测。在牛肉风干过程中,不同的风干方式可造成风味相关物质的不同。利用超高效液相色谱-质谱,有学者发现常规成熟方法挥发性物质含量较高。同样是利用超高效液相色谱-质谱的方法研究牛肉,Setyabrata 等还发现成熟牛肉中含有更多的短链多肽,但多不饱 脂肪酸和游离脂肪酸较少。
2顶空微萃取-气相色谱-质谱
顶空微萃取-气相色谱-质谱法是分析风味物质的常用方法之一,其原理是采用顶空的进样方式,通过加热使风味挥发性物质从样品中分裂,具有样品制备简单、灵敏度高等优点,但也存在样品处理复杂、分辨率低、仪器成本高、样品存在损失及非常规样品难处理等不足。顶空微萃取-气相色谱-质谱法可分为顶空液相微萃取和顶空固相微萃取2 种。在肉类风味物质的检测中,顶空微萃取-气相色谱-质谱法运用广泛。Zhen Zongyuan等采集鸭肉中3 种不同部位(胸部、腿部和翅膀),利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法提取了挥发性风味物质并进行测定,共检出81 种挥发性物质,包括15 种碳氢化合物、10 种醇、7 种酸、12 种醛、4 种酯、19 种含硫和含氮化合物以及14 种其他化合物。Zhang Xue等利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术探究不同饲养方式对藏羊肌肉代谢的影响,研究表明,畜舍饲养组的肉营养品质(包括蛋白质和脂肪含量)和食用品质(包括嫩度、持水力、口感和风味)均优于传统放牧组。
3全二维气相色谱-飞行时间质谱联用
全二维气相色谱是20世纪90年代发展起来的技术, 相较于传统气相色谱技术,其具有更高的灵敏度、选择性和峰容量,同时它的另一个优势是同系物系列(如直链烷烃、脂肪酸甲酯等)的有序洗脱模式,但是同样 存在仪器复杂、成本高、样品处理要求严格和数据分析难度大等缺点。全二维气相色谱依靠飞行时间质谱适合分析复杂的物质,其具有全范围质谱学的高采集率。基于全二维气相色谱-飞行时间质谱联用技术的众多优势,其也被用于肉类风味前体物质的检测。氨基酸和还原性碳水化合物之间的美拉德反应是导致肉类产生各种气味和味觉的重要反应之一,其有助于肉类在烹调过程被赋予更多的风味和味道。采用气相色谱-飞行时间质 谱和感官评价相结合的非目标分析方法以及结合最小二乘回归分析,Lee等发现,2-甲基呋喃-3-硫醇、3-磺基戊烷-2-酮等可能对牛肉中美拉德反应产生的风味有关键贡献。
4气相色谱-离子迁移谱
气相色谱-离子迁移谱技术在19世纪中叶发现和创新,20世纪90年代得到了蓬勃发展,其根据物质迁移时间进行定性,根据所形成的峰值和峰面积对物质定量,具有检测时间短、结果可靠及灵敏度高等优点,同时具有设备成本高、操作困难和样品需要预处理等缺点。气相色谱-离子迁移谱技术广泛应用于药物检测、疾病监控和环境保护等领域,近年来也被用于对风味物质的检测。对羊肉挥发性风味物质研究中,有学者利用气相色谱-离子迁移谱分析不同地区羊肉的挥发性风味物质发现,不同地区的羊肉以及不同品种羊肉存在差异。如青海玉树羊肉特征风味物质为2,3-丁二酮、苯甲醛、丁醇、 丙酮、2-丁酮、辛醛和1-辛烯-3-醇等,而2-戊酮和2-己醇等是四川羊肉的特征风味物质。
02核磁共振在肉类检测中的应用
核磁共振技术源于20世纪40年代,直到20世纪80年代末才开始被应用于食品领域。其基本原理是:具有活性自旋的原子核在静态磁场存在的情况下,具有能量的吸收,能量吸收主要通过适当的射频脉冲获得;在脉冲之后,被激发的原子核松弛,其发射的能量被检测为与时间关联的信号强度,该信号将产生与构成核磁共振 信号的激发核,并与激发核的数量成正比;同时每个原子核在频谱显示特定位置,由此产生的谱线可测量的参数就可用于解释分子结构、构象及分子运动等,其具有非破坏性、高分辨率、无毒性及可定量性等优点,也存在仪器复杂、分析时间长及样品准备时间长等缺点。根据磁场强度大小,核磁共振可分为3 类:高场、中场、低场。由于核磁共振技术所产生的的数据较为庞大、繁杂,所以需要对数据进行处理和分析,现有的核磁共振数据分析方法有主成分分析、偏最小二乘法判别分析和正交偏最小二乘法判别分析等。
低场和高场核磁共振在食品领域被广泛应用,低场核磁共振常用于分析食品掺假、食品含有水分类型、水分分布及水分移动等。朱莹莹等利用低场核磁共振鉴别不同干燥方式牛肉干产品,发现不同干燥加工方式牛肉干的T2弛豫特性存在显著差异,且主成分分析有明显分离。Zhang Jian等利用高场核磁共振技术研究无骨干腌火腿加工过程中代谢产物的变化,共鉴定出28 种代谢物,包括氨基酸、多肽、有机酸、核酸及其衍生物、糖等,发现氨基酸(异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、谷氨酸 和组氨酸)、有机酸(乳酸、醋酸盐、琥珀酸、柠檬酸和甲酸盐)和核苷酸衍生物(次黄嘌呤)是影响最终产品滋味的主要因素。
03电子鼻在肉类检测中的应用
仿生嗅觉技术,即电子鼻技术是一种智能仿生系统,最早应用在1982年。其主要是由传感器和模式识别系统组成,基本工作原理是:通过气体采集系统、气敏 传感器列阵和模式识别系统等部分,当被测样品中挥发 性混合气体和传感器接触时,气体与灵敏材料发生反应并产生可收集信息,再利用模式识别系统对信号进行分析,在特定类型的气味检测和识别系统中,其敏感元件的激发导致特定信号的产生。电子鼻技术目前广泛应用于食品安全、环境监测及临床医学诊断等领域。电子鼻应用于风味物质检测,具有快速、高灵敏度和非破坏性等特点,但也存在易受环境干扰、仪器昂贵和学习能力不足的缺点。在肉类风味和品质评定方面,电子鼻 技术常用于对不同品种肉类挥发性气味的检测,其主要通过风味识别、肉质评估、新鲜度识别和风味调控等方面对肉类品质进行调控。Chen Jingru等利用电子鼻和顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术分析证实了北京油鸡、鲁花鸡和AA肉鸡之间的显著差异,醛的种类较多和相对含量较高可能是北京油鸡鸡肉风味更浓郁的原因。北京油鸡必需氨基酸、花生四烯酸、肌苷一磷酸含量高于另外2 种鸡。Wilson等通过电子鼻对叉尾鱼鱼片中的气味化合物进行检测,发现其中存在异味气味化合物,同时传感器列阵输出结果表明,风味良好和风味 差的鱼片香味特征有显著差异,这都表明电子鼻技术可有效、快速评估肉类质量。需要注意的是,电子鼻在肉类风味和品质评定方面的应用仍然面临一些挑战。例如,不同品种肉类之间的挥发性化合物差异较大,因此需要建立合适的模型和数据库。此外,环境条件和样品处理等因素也可能对电子鼻的检测结果产生影响。因此,在实际应用中需要结合其他分析手段和专业知识进行综合评估和判断。
04结 语
对肉类风味物质的检测,无论是色谱-质谱联用技术,还是核磁共振波谱技术,都应用较为广泛。色谱-质谱联用技术可以同时分离和定性分析复杂的肉类风味物质,还可以提供关于风味物质的结构和含量信息。核磁共振作为一种无损分析技术,可以提供关于食品中化学成分的结构和动态信息。电子鼻技术是一种模拟人类嗅觉系统的传感器装置,可以通过探测和识别气体混合物的特征模式来辨别不同的风味。在肉类风味物质检测中,电子鼻技术可以用于分析和区分肉类产品中的挥发性风味物质,具有快速、便捷和非破坏性的特点,用于大规模的样品分析和实时的风味检测。
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参考文献:杜春林,赵春萍,谭 娅. 肉类风味物质检测技术研究进展[J]. 肉类研究, 2023, 37(8): 46-51.
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